BRAF p.V600E mutáció vizsgálata hajas sejtes leukémiában

Tisztelt Kollégák!

A BRAF gén p.V600E mutációja a hajas sejtes leukémiával diagnosztizált betegek (HCL) közel 100%-ában detektálható, ezért a kórkép molekuláris jellemzőjének tekintik. A mutáció kimutatása differenciáldiagnosztikai jelentőséggel is bír, mivel nagymértékben segíti a HCL elkülönítését a hasonló tüneteket mutató, ugyanakkor BRAF negatív variáns formáktól (HCL-v). HCL-ben a p.V600E variáns azonosítása lehetőséget biztosít a relabáló/refrakter betegek célzott terápiájára a BRAF-gátlók alkalmazása révén.

Meghatározás elve:

A mutáció kimutatása nagy felbontású olvadáspont analízissel történik (high resolution melting – HRM), amely egy gyors és érzékeny mutáció szűrő módszer. Ennek során a vizsgálati mintából (csontvelő/perifériás vér) DNS-t izolálunk, majd szekvenciaspecifikus primerek segítségével a V600E mutációt hordozó DNS szakaszt PCR reakcióban amplifikáljuk. A mutáns és vad allélek eltérő olvadáspontjuk alapján olvadási görbe analízissel különíthetők el egymástól. A módszer érzékenysége kb. 1%. A mutáció megerősítése, a nukleotid csere azonosítása Sanger szekvenálással történik.    

Mintatípus:

1 db EDTA-val alvadásgátolt csontvelő/perifériás vér

Vizsgálatkérés:

A MEDSOLUTION rendszerben a KIZMONK kérőlapon 

„BRAF p.V600E mutáció vizsgálata” megjelölésével.  

Eredményközlés: 2 héten belül

A vizsgálatok pontértéke:  18 098 pont (amennyiben megerősítő Sanger szekvenálás is szükséges: 39 882 pont)

A vizsgálatkéréssel kapcsolatban felmerülő kérdések esetén kérjük forduljanak Dr. Ujfalusi Anikó részlegvezetőhöz (56559 mellék).

Debrecen, 2021. május 3.

Dr. Kappelmayer János s.k.

egyetemi tanár

a Laboratóriumi Medicina Intézet igazgatója

Irodalom:

1. Maitre E, Cornet E, Troussard X. Hairy cell leukemia: 2020 update on diagnosis, risk stratification, and treatment. Am J Hematol. 2019 Dec;94(12):1413-1422. doi: 10.1002/ajh.25653. Epub 2019 Oct 31. PMID: 31591741.

2. Boyd EM, Bench AJ, van 't Veer MB, Wright P, Bloxham DM, Follows GA, Scott MA. High resolution melting analysis for detection of BRAF exon 15 mutations in hairy cell leukaemia and other lymphoid malignancies. Br J Haematol. 2011 Dec;155(5):609-12. doi: 10.1111/j.1365-2141.2011.08868.x. Epub 2011 Sep 13. PMID: 21910720.